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技術支持

大鼠腦電圖的測量方法

時間:2015-08-31來源:本站作者:玉研儀器

  1.2.1 大鼠頭皮導聯描記 大鼠以水合氯醛腹腔麻醉(劑量為350mg/kg),俯臥位固定,取兩眼外眥與外耳門連線的前中1/3交點處作一連線,并于此連線中點旁開1mm處(相當于冠狀縫后矢狀縫旁開1mm)。用自制的尖端有倒鉤(防止脫落)的銀電極刺入皮下,為作用電極;參比電極插在同側頸部皮下。描記腦電圖, 記錄腦電圖形態,并計算腦電圖各波的相對功率值(相對功率值=各波的絕對功率值/總功率值×100%)。

  1.2.2 1.2.2  大鼠皮層導聯描記 麻醉同上。常規暴露大腦皮層。將電極置于大腦皮層;參比電極插在同側頸部皮下。描記腦電圖,記錄腦電圖形態,并計算腦電圖各波的相對功率值。處理系統為BM1118數字腦電地形圖,描記條件為時值0.3,增益0.5cm=50μV。

  1.2.3 1.3 腦電監測記錄方法 清醒狀態下將大鼠固定,采用頭皮針電極,雙極導聯法(額-頂)連接。電極分別取兩眼連線中點(額葉)及兩耳連線中點(頂葉)插入固定,鼻根部接地線。電極導線經艙壁接線柱引出艙外。用腦電趨勢監測儀從加壓前10min開始,到減壓出艙后10min結束,以連續功率譜方式監測大鼠的腦電活動(帶通3~30HZ),并用計算機錄入全過程的大鼠腦電圖。

  1.2.4 1.3 大鼠腦電記錄:大鼠麻醉后,在顱骨正中十字縫左旁開4mm的中央區處鉆孔,除尖端處外均絕緣的金屬電極直至硬腦膜。另外在正中線上的額前端(前鹵前1.5cm)同樣埋入電極,作為地線電極,均用牙科凝固劑固定,作單個雙導EEG記錄。

  1.2.5 1.3  EEG描記在大鼠雙側大腦皮層、海馬放置針電極,直徑0.5mm。額葉皮層電極:前囟前2mm,中線旁2mm,硬膜下0.5mm。海馬CA3區電極:前囟后3.8mm,中線旁2mm,硬膜下2.6mm。全部電極用牙托粉加502膠水固定。電極連接:1左皮層—左海馬;2右皮層—右海馬;3左皮層—右皮層;4左海馬—右海馬。參考電極置鼻尖。定標:2mm=50mV。紙速:30mm/s。

  1.2.6 (1)大鼠頭骨包埋電極:大鼠在氯氨酮麻醉狀態下,暴露頭骨,在頭骨矢狀縫左側,分別距前囟旁2mm、前2mm和旁2mm、后4mm處,顱骨鉆孔,使其能插入銀絲記錄和參照電極,用502膠與牙托粉固定,術后動物食用水中加羥氨芐青霉素常規預防感染2d。

  1.2.7 大鼠動態皮層腦電圖檢測 在骨窗前后緣相當于損傷灶前后部位各安裝二個螺絲電極(健側電極位置參考骨窗側),保障螺絲釘必須與腦皮層牢固和密切接觸,參考電極置于雙側耳后。分別于致傷前、致傷后(用藥前)和用藥后描記雙側額頂皮層EEG。局部注射后連續觀察30min,以后每間隔min記錄1min。

  1.2.10 1h后用水合氯醛(340mg?kg-1,ip)麻醉進行氣管插管,將大鼠固定在立體定位儀上。切開頭部皮膚,分離皮下組織,暴露顱骨,在前囟前、后分別2mm和7mm右側旁開2mm處埋藏皮層電極(不傷及硬腦膜)。用2根事先焊上導線的直徑約1 7mm的鐘表螺絲旋入兩孔中,深度約1 5mm。將螺絲的接線與多導儀的正負極輸入相聯,立體定位儀的耳桿接地作為參照電極。待大鼠皮層腦電穩定后,ip氯化琥珀酰膽堿1 2mg?kg-1以維持動物的肌松狀態。用燈照射大鼠背部使大鼠的肛溫維持在35℃左右。將氣管插管接在呼吸機的輸出端,呼吸機頻率為每分鐘35~40次,潮氣量2 5~3 5ml。關閉呼吸機2mg?kg,記錄從關閉開始到皮層腦電平均振幅達到最低的時間。2mg?kg后恢復供氣,腦電逐漸恢復正常。10mg?kg后關閉呼吸機3mg?kg,記錄從關閉開始到皮層腦電完全恢復的時間。

  1.2.11 實驗。將清醒兔俯臥位固定在兔臺上。在左、右腦的額、顳、頂、枕各區頭皮放置鉤形針狀電極,在左、右耳部放置無關電極和參考電極。待兔安靜后,用CFM—8 數字化EEG機(上海海神研究所生產)記錄用藥前后的EEG原始數據。EEG的處理是根據其頻率分為δ、θ、α1、α2、β1、β26個頻段,通過功率絕對值計算其功率百分比。頻段劃分:δ(0 8~3 8Hz),θ(4 0~7 8Hz),α1(8 0~12 8Hz),α2(11 0~12 8Hz),β1(13 0~17 8Hz),β2(18 0~30 0Hz)。 3組兔分別靜脈注射異丙酚(英國ZENECA公司產品,批號032000)2 5、5、10mg/kg,藥物均在30s內勻速注完。記錄給藥前和開始給藥后20、30、40、50、60、70、80、90、100、110s,2、5、10、15、20、30min的QPEEG。每時間點采樣時間為5s。另取兔18只,隨機分為3組,每組6只,分別在30s內靜脈注射上述劑量的異丙酚,觀察兔翻正反射消失的潛伏期和持續期(潛伏期指從剛開始給藥到翻正反射剛消失之間的時間,持續期指從翻正反射剛消失至剛恢復的時間)。數據用 x±s表示,應用SAS軟件中配伍組方差分析后,用Dunnett法,對各時間點數據與用藥前比較。此外,給藥后各時間點數據還與異丙酚劑量進行直線相關分析(用SAS軟件處理),求出其相關系數r,揭示其量效關系。

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